大賽璐手性柱又叫手性色譜柱,是由具有光學(xué)活性的單體固定在硅膠或其它聚合物上制成的手性固定相。其通過引入手性環(huán)境,使對(duì)映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。要實(shí)現(xiàn)手性識(shí)別,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用,包括氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。這些相互作用通過影響包埋復(fù)合物的形成、特殊位點(diǎn)與分析物的鍵合等而改變手性分離結(jié)果。
大賽璐手性柱的操作事項(xiàng)主要包括使用前準(zhǔn)備、操作條件控制、添加劑使用等。具體如下:
1、使用前準(zhǔn)備:色譜柱出廠保存條件為正己烷/異丙醇=90/10,使用時(shí)需先用此比例溶劑沖洗色譜柱30分鐘,再更換為目標(biāo)流動(dòng)相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn)。接入色譜柱前,須先用合適的溶劑沖洗流路,避免使用強(qiáng)溶劑如丙酮、氯仿等。色譜柱建議專柱專用,避免混用導(dǎo)致污染或損壞。
2、操作條件控制:根據(jù)色譜柱標(biāo)簽上的箭頭確定流動(dòng)相方向,確保正確連接。典型流速為1.0 mL/min,柱壓范圍應(yīng)低于15.0 MPa,pH值范圍在2~8之間,操作溫度建議控制在10~50℃。
3、添加劑使用:為實(shí)現(xiàn)較好的手性分離效果,可在流動(dòng)相中加入合適的添加劑,但需注意添加劑與溶劑的互溶性。
4、維護(hù)保養(yǎng):必須使用色譜級(jí)試劑配制流動(dòng)相,并經(jīng)0.45μm濾膜過濾及超聲脫氣處理。樣品在進(jìn)樣前需過濾樣品溶液,防止雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱。正相色譜柱在使用含酸/堿添加劑的正相流動(dòng)相后,需用正己烷/異丙醇=90/10沖洗色譜柱50分鐘,然后用此比例溶劑封存。